Las pruebas de rotavirus implican principalmente la detección de antígenos virales, ácidos nucleicos o partículas virales en muestras fecales. Los métodos comunes incluyen la detección de antígenos de oro coloidal, la detección de ácidos nucleicos por PCR y la microscopía electrónica. El método específico debe elegirse en función de los síntomas clínicos y las condiciones de laboratorio.
Métodos de detección comunes
Detección de antígeno de oro coloidal (detección rápida)
Principio: este método utiliza una tira reactiva de oro coloidal marcada con anticuerpos específicos para identificar antígenos de rotavirus en las heces.
Procedimiento: Se mezcla una pequeña cantidad de muestra fecal con un diluyente y se agrega a la tira reactiva. El resultado está determinado por las bandas de color (los resultados positivos muestran dos bandas) después de 15 a 30 minutos.
Ventajas: Rápido, sencillo de operar y de bajo costo; Adecuado para clínicas ambulatorias o instituciones de atención primaria de salud.
Limitaciones: Baja sensibilidad (aproximadamente 80-90%); pueden ocurrir falsos negativos; incapaz de distinguir subtipos virales.
Detección de ácidos nucleicos por PCR
Principio: la detección se logra amplificando fragmentos de genes específicos del rotavirus- (como los genes VP6 y VP7).
Procedimiento: El ARN viral se extrae de las heces, se transcribe de forma inversa en ADNc y luego se amplifica mediante PCR. Los resultados se analizan mediante electroforesis o sondas fluorescentes.
Ventajas: Alta sensibilidad (cerca del 100%), puede distinguir subtipos virales (p. ej., G, P), adecuado para estudios epidemiológicos.
Limitaciones: Requiere equipos y técnicos especializados; alto costo; Tiempo de procesamiento prolongado (aproximadamente 4-6 horas).
Ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima-(ELISA)
Principio: utiliza anticuerpos-marcados con enzimas para unirse a antígenos virales, cuantificando la detección mediante una reacción colorimétrica.
Escenarios aplicables: escenarios de investigación o selección de muestras por lotes.
Observación por microscopía electrónica
Principio: Observa directamente partículas de rotavirus (normalmente "en forma de rueda-") en muestras fecales.
Limitaciones: Equipo costoso, operación compleja; rara vez se utiliza clínicamente.
